26-10-900. ОСМОТИЧЕСКАЯ СТОЙКОСТЬ ЭРИТРОЦИТОВ (АНЕМИИ)

Гемолиз – процесс завершения четырехмесячного цикла жизни эритроцитов, разрушающихся естественным путем или воздействием на их оболочки ядов, инфекционных агентов, антител, лекарственных препаратов.

Номенклатура МЗРФ (Приказ №804н): «Исследование осмотической резистентности эритроцитов»

Биоматериал: Кровь ЭДТА

Срок выполнения (в лаборатории): 8 р.д.*

Описание

Под осмотической резистентностью эритроцитов понимается их устойчивость по отношению к гипотоническим растворам натрия хлорида. Минимальная резистентность эритроцитов определяется максимальной концентрацией гипотонического раствора натрия хлорида (в серии растворов с постепенно уменьшающейся концентрацией), при которой начинается гемолиз наименее устойчивых эритроцитов, находящихся в растворе в течение 3 ч; максимальная — минимальной концентрацией гипотонического раствора натрия хлорида, вызывающего в течение 3 ч гемолиз всех эритроцитов крови, помещенных в этот раствор. Под минимальной осмотической резистентностью эритроцитов понимают максимальную концентрацию гипотонического раствора натрия хлорида, при которой начинается гемолиз наименее устойчивых эритроцитов, которые находятся в растворе 3 часа. Под максимальной осмотической резистентостью эритроцитов понимают минимальную концентрацию гипотонического раствора хлорида натрия, вызывающего в течение 3 часов гемолиз всех эритроцитов, помещенных в раствор. Максимальная осмотическая резистентность ниже 0,32 % возможна после больших кровопотерь и спленэктомии, при гемоглобинозе С, застойных желтухах, а также в некоторых случаях полицитемии. Повышение осмотической резистентности эритроцитов ниже 0,32 % характерно для талассемии и гемоглобинопатии. Минимальная осмотическая резистентность выше 0,48 % наблюдается при семейной гемолитической анемии, гемолитической анемии новорожденных и отравлении свинцом. Можно обнаружить небольшие изменения и при токсикозах, бронхопневмониях, туберкулезе, малярии, лейкемии, миелосклерозах, лимфогранулематозе, циррозе печени. Случаи расширения границ осмотической резистентности (одновременное понижение минимальной и повышение максимальной Сниженная осмотическая стойкость эритроцитов в гипотонических растворах свидетельствует об структурных дефектах мембраны эритроцита, обусловленных генами мембранных белков. В отличии от сфероцитоза при гемоглобинопатиях (талласемии и S-гемоглобинопатии) возникает относительный избыток мембраны, что ведет к увеличению осмотической стойкости клеток для гипотонического лизиса, поэтому тест позволяет проводить между наиболее частыми причинами наследственных гемолитических анемий. 

Читайте также:  Анализы крови при тромбоцитопенической пурпуре

Показания к назначению

Поводом для обследования будет соответствующая клиническая картина. Специфических симптомов, которые будут характерны только отклонению от нормы резистентности нет. Может присутствовать симптоматика такого характера: бледность кожных покровов; снижение веса без видимой причины;повышенная утомляемость и нарастающая слабость, что будет больше похоже на синдром хронической усталости; плохой аппетит; сонливость; обострение хронических заболеваний. При наличии клинической картины нужно обращаться к врачу. Первоначально это врач общей практики, то есть терапевт. Далее обследованием занимаются гематолог и смежные специалисты. Если диагностически будет установлено, что показатели ниже или выше допустимых, в обязательном порядке нужно проходить лечение, так как большая часть этиологических факторов представляет опасность не только для здоровья, но и для жизни пациента.

Интерпретация результатов/Информация для специалистов

Единицы измерения — %. Референсные значения: Осмотический лизис эритроцитов при концентрации NaCl 0,5 г/дл 3-53%, осмотический лизис эритроцитов при концентрации NaCl 0,6 г/дл (после инкубации при +37 ºC) 14-74% , осмотический лизис эритроцитов при концентрации NaCl 0,65 г/дл (после инкубации при +37 ºC) 4-40% , осмотический лизис эритроцитов при концентрации NaCl 0,75 г/дл (после инкубации при +37 ºC) 1-11%. Причины максимальной осмотической резистентности эритроцитов ниже 0,32%: массивные кровопотери; спленэктомия; гемоглобиноз С; застойная желтуха; некоторые случаи полицитемии; талассемия; гемоглобинопатия. Причины минимальной осмотической резистентности эритроцитов выше 0,48%: семейная гемолитическая анемия; гемолитическая анемия новорожденных; отравление свинцом. Расширение границ осмотической резистентности эритроцитов наблюдается в начале острого гемолитического криза, в остром периоде пернициозной анемии.   

Метод определения показателя

В лаборатории исследование осмотической устойчивости эритроцитов проводят разведением крови в растворах поваренной соли (NaCl) различных концентраций. В сравнении с содержанием ионов натрия и хлора в цитоплазме эритроцитов выделяют растворы:

  • Изотонический. Концентрация соли равна примерно 0,9% – это ее норма в крови. В нем изменения клеток крови не происходит. Широко известно другое его название – физиологический раствор (физраствор).
  • Гипотонические. Концентрация ионов в них ниже, из-за осмотического давления в эритроциты поступает вода, и они набухают вплоть до гемолиза (разрушения).
  • Гипертонические. Содержание соли в них больше – клетки отдают воду и съеживаются.
Читайте также:  Влияние курения на дыхательную и кровеносную системы

Методика оценки осмотической резистентности эритроцитов следующая:

  • в пробирки наливают гипотонические растворы (так как в них наблюдается гемолиз) поваренной соли различных концентраций (обычно в диапазоне от 0,22 до 0,7%),
  • добавляют по 0,02 миллилитра собранной из пальца или из вены (оттуда результаты будут «чище») крови,
  • полученные растворы держат на экспозиции около часа (для воздействия осмотического давления на эритроциты),
  • после содержимое пробирки центрифугируют.

По оттенку определяют степень гемолиза (полный гемолиз – ярко-красный раствор, его начало – раствор с розоватым оттенком), для получения более точных показателей используют фотоколориметр – аппарат для оптического измерения концентрации вещества.

Метод определения показателя

В лабораторной диагностике для определения осмотической резистентности эритроцитов используют следующие показатели:

  • Максимальная резистентность. Она равна концентрации раствора NaCl, при которой в течение трех часов происходит полный гемолиз. Норма для взрослого человека – от 0,32 до 0,34%, норма для детей грудного возраста – 0,24-0,32%, дошкольного возраста – 0,26-0,36%.
  • Минимальная резистентность. Равна концентрации того же раствора, при которой в течение трех часов гемолизу подвергаются только малоустойчивые клетки (цвет раствора получится слегка розовым). Норма для взрослого человека – 0,46-0,48%, норма для детей грудного возраста – 0,46-0,50%, дошкольного возраста – 0,46-0,48%.

В целом у людей солидного возраста осмотическая резистентность эритроцитов ниже, у детей она выше, но ее диапазон шире.

Причины изменения показателей

Повышение осмотической стойкости (максимальная резистентность меньше 0,32%) возникает при следующих патологиях:

Причины изменения показателей
  1. Массивные кровопотери (более 5% от объема крови), так как в качестве компенсаторного механизма в крови увеличивается число молодых эритроцитов, но в условиях дефицита ресурсов. В итоге образуется большое количество клеток с недостаточно прочными мембранами.
  2. Атеросклероз: производные холестерина могут откладываться на мембране эритроцита, что приводит к изменению ее свойств.
  3. Механическая желтуха, ее причины: закупорка желчевыводящих протоков вследствие образования желчных камней, заболевания желчного пузыря и некоторые болезни печени.
  4. Наследственные анемии, связанные с изменением структуры гемоглобина (гемоглобинопатии): талассемия, серповидно-клеточная анемия.
  5. Наследственные заболевания, в результате которых изменяется структура мембраны эритроцитов (мембранопатии).
  6. Состояние после удаления селезенки.
  7. Истинная полицитемия – чрезмерное увеличение количества клеток крови из-за опухоли в кроветворных органах.
  8. Рак органов желудочно-кишечного тракта.
Причины изменения показателей

Снижение осмотической резистентности (минимальная становится выше 0,48%) может быть связано с:

Причины изменения показателей
  1. Отравлением свинцом и его производными.
  2. Гемолитической анемией, при которой происходит массивный гемолиз красных кровяных телец. Причины различны: аутоиммунные, наследственные заболевания, гемолитическая желтуха новорожденных и другие.
  3. Небольшое снижение возможно из-за туберкулеза, сердечной недостаточности, лейкоза (рак крови), цирроза печени.
Причины изменения показателей

Причины изменения показателей

Что это такое

Для того, чтобы понять, что такое гемолиз, необходимо разобрать процесс жизнедеятельности красных телец крови. Для эритроцитов, как и для множества клеток человеческого организма, свойственно образование и распад. Их жизненный цикл в среднем длится в пределах 120 дней. Распад данных клеток получил название гемолиз эритроцитов. Он может наблюдаться в селезенке, где разрывается поверхностный слой эритроцита и гемоглобин, содержащийся в нем, поступает в кровяной поток.

Этот процесс является физиологическим и необходим для полноценной работы органов и систем человеческого организма. Суть еще одного вида гемолиза заключается в разрушении эритроцита в сосудах. В результате образуется лаковая кровь. Для выведения образовавшийся гемоглобин связывается с белком, который предназначен для этого, и выводится в печень. В этом органе происходит несколько реакций, в результате которых гемолизированный гемоглобин преобразуется в билирубин — конечный продукт распада.